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http://ciad.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1006/97| ANÁLISIS DE LA REGULACIÓN EN LA EXPRESIÓN DE GENES QUE CODIFICAN PARA ADN METILTRANSFERASAS EN EMBRIONES DE UVA (Vitis vinifera) cv. RED GLOBE CRIOCONSERVADOS | |
| HERIBERTO GARCIA CORONADO | |
| MARTIN ERNESTO TIZNADO HERNANDEZ | |
| Acceso Abierto | |
| Atribución-NoComercial-SinDerivadas | |
| Tecnología de alimentos de origen vegetal | |
| El presente estudio tuvo como objetivo diseñar un protocolo para la crioconservación por vitrificación de embriones cigóticos de V. vinifera cv. `Red Globe´ y evaluar el efecto del tratamiento sobre la expresión de genes codificando ADNMET’s. Se diseñaron tratamientos de vitrificación y crioconservación utilizando la solución de vitrificación de plantas 2 (PVS2) y nitrógeno líquido (NL), en donde se evaluó el efecto del tiempo de inmersión en PVS2 y en NL sobre la viabilidad de los embriones evaluada mediante el desarrollo del embrión o reducción del cloruro de 2,3,5-trifeniltetrazolio (TTC). Se creó una genoteca de expresión de embriones cigóticos de uva para identificar secuencias de expresión etiquetadas (SETIS) de genes codificando ADNMET’s. Se analizó la expresión de SETIS de ADNMET’s mediante cuantificación por transcriptasa reversa reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa (qTR-RCP). Se observó reducción en la viabilidad de los embriones con el aumento en el tiempo de inmersión en la solución de PVS2 y NL evaluada mediante TTC. Las condiciones óptimas de vitrificación fueron 10 minutos en PVS2 al 50% a 25 oC seguido por 10 minutos en PVS2 al 100% a 4 oC. Mediante estas condiciones, fue posible inducir el desarrollo en el 30% de los embriones tratados después de una inmersión en NL durante 30 minutos. Se lograron amplificar y secuenciar dos SETIS de la familia 5-citosina ADN metiltransferasa de dominios alterados (DRM), dos SETIS de la familia 5-citosina ADN metiltransferasa tipo 1 (MET1) y un SETI de la familia de 5-citosina ADN metiltransferasa modificadora de la cromatina (CMT). Se registraron alteraciones en la expresión de uno de los genes que codifican ya sea para MET1 o DRM debido al tratamiento de crioconservación por vitrificación mediante qTR-RCP. Se concluye que los genes analizados son parte del mecanismo de regulación epigenética y que posiblemente los tratamientos de vitrificación y crioconservación alteran el patrón de metilación del ADN en embriones cigóticos de uva. | |
| Centro de Investigación en Alimentación y Desarrollo, A.C. | |
| 30-01-2015 | |
| Tesis de maestría | |
| Español | |
| Nacional | |
| Público en general | |
| BIOLOGÍA Y QUÍMICA | |
| Versión publicada | |
| publishedVersion - Versión publicada | |
| Aparece en las colecciones: | TESIS DE MAESTRÍA EN CIENCIAS. |
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