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http://ciad.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1006/723| CARACTERIZACIÓN INMUNOQUÍMICA Y MOLECULAR DE ANTIGENOS INMUNODOMINANTES DE Giardia lamblia EN UN MODELO MURINO DE GIARDIASIS | |
| GLORIA CAROLINA LOPEZ ROMERO | |
| HUMBERTO FRANCISCO ASTIAZARAN GARCIA CARLOS ARTURO VELAZQUEZ CONTRERAS MARIA AUXILIADORA ISLAS OSUNA LUIS QUIHUI COTA ALDO ALEJANDRO ARVIZU FLORES | |
| Acceso Abierto | |
| Atribución-NoComercial-SinDerivadas | |
| NUTRICION | |
| Giardia lamblia es un parásito protozoario intestinal que infecta a humanos y algunos mamíferos. Se conocen ocho genotipos del parásito clasificados del A al H, pero solo A y B infectan humanos. La eliminación de Giardia del intestino requiere la activación de mecanismos inmunológicos en el hospedero mediados por células B y T. No obstante, el conocimiento acerca de las proteínas del parásito que inducen una respuesta inmunológica eficaz es limitado. Estudios previos de nuestro grupo de investigación reportaron el antígeno 5G8 de Giardia GS/M83-H7 como altamente inmunogénico, y sugirieron que podría ser una proteína de choque térmico (HSP70) llamada BIP. El objetivo del presente trabajo fue caracterizar inmunoquímica y molecularmente los antígenos de G. lamblia 5G8 y BIP en un modelo de infección murino. Para ello, se sobreexpresó y purificó BIP recombinante con la que se generaron anticuerpos policlonales. Mediante Citometría de Flujo y Western blotting se determinó que el perfil de expresión de 5G8 y BIP en la superficie de trofozoítos GS/M83-H7 y GS/M83-H7-5G8(+) fue distinto (5G8 en 2-95% y BIP en < 1% de la población), lo que sugiere que son antígenos diferentes. El análisis de la respuesta inmune humoral por ELISA y Western blotting determinó que BIP es reconocido por sueros de ratones reinfectados. La respuesta inmune celular se evaluó mediante ensayos de proliferación por MTT, empleando esplenocitos de ratones infectados. Sin embargo, en las condiciones evaluadas no se detectó estimulación por parte de BIP. Se determinó mediante algoritmos de predicción de epítopes de células B y T, que BIP posee en su secuencia regiones con alta probabilidad de ser reconocidas por el sistema inmune del hospedero. Incluso, el epitope 590-609 podría ser reconocido por ambas células. Por otro lado, el análisis molecular de 5G8 determinó que pertenece a la familia de proteínas variables de superficie (VSP) de Giardia. El gen vsp-5g8 se amplificó por PCR y se obtuvo la secuencia nucleotídica (1824 pb) que codifica para VSP-5G8 (607 aminoácidos, 61 kDa), presente en Giardia genotipo B. Los análisis de homología y predicción de epítopes de VSP-5G8 indicaron que posee epítopes de alta probabilidad que además están conservados en otras VSP de diferentes genotipos de Giardia. | |
| 2016 | |
| Tesis de doctorado | |
| Español | |
| Público en general | |
| QUÍMICA ANALÍTICA | |
| Versión publicada | |
| publishedVersion - Versión publicada | |
| Aparece en las colecciones: | TESIS DE DOCTORADO EN CIENCIAS (DC) |
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