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OBTENCIÓN Y EVALUACIÓN BIOLÓGICA DE PROTEÍNAS DE SOYA ENRIQUECIDAS ENZIMÁTICAMENTE CON AMINOÁCIDOS RAMIFICADOS EN RATAS CIRRÓTICAS
MARÍA FÁTIMA RODRIGUEZ HERNÁNDEZ
ANA MARIA CALDERON DE LA BARCA COTA
MAURO EDUARDO FERNANDO VALENCIA JUILLERAT
JOSE GUILLERMO LOPEZ CERVANTES
JUAN PEDRO CAMOU ARRIOLA
Acceso Abierto
Atribución-NoComercial-SinDerivadas
NUTRICIÓN
El tratamiento nutricio de los enfermos cirróticos en México se realiza con fórmulas importadas, basadas en aminoácidos libres de los cuales al menos el 30% son de cadena ramificada (AACR). Por ello además de caras, dichas fórmulas presentan problemas de solubilidad y sabor. Con tecnología enzimática se pueden unir covalentemente los AACR a una proteína vegetal de bajo costo y con características convenientes para que la modificación sea mínima. En este estudio se modificó enzimáticamente la proteína de soya para enriquecerla con AACR y se evaluó su capacidad nutricia y terapéutica en ratas cirróticas por obstrucción de la vía biliar. Las características requeridas en la proteína modificada fueron: >30% de MCR, una relación de MCR:AAA (aminoácidos aromáticos) >3 y de Val:lle:Leu de 1:1:2. La proteína de soya se modificó por hidrólisis y síntesis enzimáticas. La hidrólisis se realizó al 4% (p/v) con enzimas pancreáticas porcinas al 4% (p/p), 50 ºC, 6 h y pH 8. Las condiciones de síntesis enzimática, se probaron a diferentes tiempos (3 y 6 h). pHs (6 y 7) y cantidades de AACR añadidos a la reacción como metil ésteres (Leu: 9 - 22.75 y Val: 25 - 68.2 g/100g de hidrolizado), a 20% (p/v) de sustrato, 1% (p/p) de quimiotripsina, 3 M de glicerol y 37ºC. Al hidrolizado enriquecido se le removió el material menor de 1 kDa por ultradiafiltración y se determinó su contenido de aminoácidos por cromatografía de alta resolución. Las mejores condiciones de síntesis fueron pH 7 y 3 h. Las cantidades de metil éster de Leu y Val a añadirse a la reacción fueron de 9 y 20.5 g/100g de hidrolizado, respectivamente. De esta forma se logró obtener una proteína modificada con 33% de AACR y relaciones AACRAAA y Val:lle:Leu de 4.6 y 1.6:1:2.3, respectivamente. La eficiencia terapéutica y nutricia de la proteína modificada se evaluó en un modelo de ratas adultas cirróticas. A éstas se les indujo daño hepático a través de la ligadura del conducto biliar (colédoco) La aparición de fibrosis portal observada en la histología fue considerada como diagnóstico del desarrollo de cirrosis, lo cual ocurrió a las 3 semanas después de la obstrucción biliar. La proteína modificada (SN) fue comparada con caseína (CS) y Hepatic Aid II® (HA). La proteína modificada mostró mejor calificación química, balance nitrogenado (p<0.05) y ganancia de peso/g de proteína consumida que la HA, pero igual a CS. Sin embargo, SN fue la mejor para normalizar los niveles plasmáticos de AACR:AAA (2.6 en SN respecto 1.
1999
Tesis de maestría
Español
Público en general
QUÍMICA
Versión publicada
publishedVersion - Versión publicada
Aparece en las colecciones: TESIS DE MAESTRÍA EN CIENCIAS.

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