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CARACTERIZACIÓN BIOFÍSICA DE LA INTERACCIÓN PROTEÍNA-CARBOHIDRATO EN DOS PROTEÍNAS DEL CAMARÓN BLANCO, Penaeus vannamei
CLAUDIA LUCIA VARGAS REQUENA
ROGERIO RAFAEL SOTELO MUNDO
ANA MARIA CALDERON DE LA BARCA COTA
ADELA RODRIGUEZ ROMERO
ALEJANDRA HERNANDEZ SANTOYO
Acceso Abierto
Atribución-NoComercial-SinDerivadas
TECNOLOGÍA DE ALIMENTOS DE ORIGEN ANIMAL
Se realizó la caracterización biofísica de la interacción proteína-carbohidrato de la HDL/ BGBP (lipoproteína de alta densidad/proteína unidora de beta-glucanos) y lisozima de camarón blanco Penaeus vannamei. Las dos proteínas participan en el sistema de defensa de este crustáceo. La HDL/BGBP reconoce carbohidratos con uniones del tipo -1,3 y la lisozima hidroliza el enlace glucosídico -1,4, los cuales se encuentran en hongos y bacterias, respectivamente. La caracterización de estas proteínas se realizó mediante técnicas biofísicas como dispersión dinámica de luz, dicroísmo circular y calorimetría de titulación isotérmica. Además se usó el método de dífusión de vapor en gota colgante para cristalizar ambas proteínas en ausencia y presencia de sus respectivos sustratos. La lisozima recombinante de camarón se purificó por cromatografía de intercambio iónico y presentó dos picos máximos de actividad, a pH 5.0 y 9.0. La estructura secundaria de la lisozima a pH 7.0 es predominantemente hélices alfa (29 %), mientras que a pH 5.5 presenta una estructura con 24 % de hojas beta y 29 % de hélices alfa. El punto isoeléctrico es de 8.5 y su masa molecular de 17.1 kDa. El NaCI no altera considerablemente la agregación de la proteína y la quitotriosa disminuye su estado de agregación conforme se acerca a su saturación. Los cambios en estructura secundaria de la lisozima-quitotriosa muestran un incremento en el contenido de beta-plegados conforme se satura la proteína. La constante de asociación lisozima-quitotriosa presenta valores en un orden de magnitud mayor a los reportados para las lisozima de gallina y de ganso. La cristalización de la lisozima se logró en presencia y ausencia de quitotriosa, utilizando condiciones diferentes a las reportadas para las lisozimas de diferentes fuentes cristalizadas a Ia fecha.
2005
Tesis de doctorado
Español
Público en general
QUÍMICA
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