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http://ciad.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1006/641| "Clonación del gen para Trehalosa 6-Fosfato Fosfatasa de Selaginella lepidophylla | |
| JUAN PABLO VALENZUELA AVENDAÑO | |
| ELISA MIRIAM VALENZUELA SOTO ANA MARIA CALDERON DE LA BARCA COTA LUZ VAZQUEZ MORENO GLORIA MARTINA YEPIZ PLASCENCIA | |
| Acceso Abierto | |
| Atribución-NoComercial-SinDerivadas | |
| CIENCIAS DE LOS ALIMENTOS | |
| El disacárido no reductor α-D-Glucopiranosil,α-D-glucopiranósido (trehalosa) se acumula bajo situaciones de estrés en diversos organismos, tales como bacterias, algas, levaduras, hongos e invertebrados. La trehalosa puede actuar como protector de biomoléculas, membranas y servir además como fuente de carbono y energía. Más aún, recientemente se plantea que su intermediario o sus enzimas de síntesis regulan el metabolismo de glucosa. En plantas solo algunas especies de los géneros llamados "de resurrección" tienen capacidad de acumular el disacárido trehalosa, como Selaginella lepidophylla. Esta planta presenta una elevada capacidad de resistir condiciones de estrés tales como: largos períodos de sequía, temperaturas extremas, radiación ionizante, luz ultravioleta, etc. Por todo esto S. lepidophylla presenta un insuperable modelo de estudio de respuesta a estrés y biosíntesis de trehalosa en plantas. En este trabajo se realizó la búsqueda del gen que codifica para la segunda enzima de síntesis de trehalosa, la trehalosa 6-fosfato fosfatasa de S. lepidophylla. Para esto se obtuvo ARN de plantas en diferentes estados de hidratación y deshidratación modificando la técnica de Chomczynski & Sacchi mediante la inclusión de un paso de precipitación con LiCI. El ARN extraído se utilizó para la construcción de un banco de ADNc. Por otro lado, una cepa de S. cerevisiae Δtps2 se transformó con un banco de genes de S. lepidophylla construida en un vector para expresión en levadura. Las clonas de S/tpp fueron identificadas mediante la complementación funcional de cepas transformadas. Se determinó actividad de trehalosa 6-fosfato fosfatasa a las levaduras complementadas encontrándose mayor actividad en estas con respecto a la cepa mutante. Con la secuencia de amino ácidos deducida a partir de la secuencia del ADN plasmídico fue posible obtener péptidos que tienen alta similitud con actividad de fosfatasa. | |
| 2005 | |
| Tesis de maestría | |
| Español | |
| QUÍMICA | |
| Versión publicada | |
| publishedVersion - Versión publicada | |
| Aparece en las colecciones: | TESIS DE MAESTRÍA EN CIENCIAS. |
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|---|---|---|---|---|
| Valenzuela-Avendaño J P_MC_2005.pdf | 7.68 MB | Adobe PDF | Visualizar/Abrir |