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REGULACIÓN DE LOS GENES GLUCOLÍTICOS HEXOCINASA Y LACTATO DESHIDROGENASA POR EL FACTOR INDUCIDO POR HIPOXIA 1 EN EL CAMARÓN Litopenaeus vannamei
JOSE GUADALUPE SONANEZ ORGANIS
GLORIA MARTINA YEPIZ PLASCENCIA
ELISA MIRIAM VALENZUELA SOTO
SILVIA GOMEZ JIMENEZ
ROGERIO RAFAEL SOTELO MUNDO
Acceso Abierto
Atribución-NoComercial-SinDerivadas
La producción de energía en animales aerobios depende de la disponibilidad de oxígeno en el medio. Durante su ciclo de vida los crustáceos marinos sufren períodos de hipoxia (baja concentración de oxígeno) por lo que su demanda de energía (ATP) puede estar comprometida. Generalmente se ha aceptado que los crustáceos sometidos a hipoxia tienen un ajuste metabólico vía glucólisis anaerobia para satisfacer su demanda energética. Sin embargo, se desconocen los mecanismos moleculares que inducen esta ruta. En mamíferos, el factor de trascripción inducido por hipoxia 1 (HIF-1), formado por una subunidad α y una β, induce la expresión de diversos genes, incluyendo los que codifican para algunas enzimas glucolíticas. Por lo anterior, HIF-1 puede ser el responsable de inducir la glucólisis anaerobia en crustáceos expuestos a hipoxia. Con la finalidad de conocer los mecanismos moleculares que inducen la glucólisis anaerobia durante la hipoxia en el camarón blanco Litopenaeus vannamei, se caracterizaron los cDNAs de HIF-1 (α y β). Además, se silenciaron ambas subunidades en camarones por RNA de interferencia (RNAi) y se sometieron a hipoxia. Se evaluó el efecto del silenciamiento de HIF-1 sobre las concentraciones de glucosa y lactato en hemolinfa, branquias y músculo. También, se evaluó el efecto del silenciamiento sobre la cantidad de transcritos de HIF-1 (α y β), hexocinasa (HK) y lactato deshidrogenasa (LDH) mediante RT-PCR cuantitativo en tiempo real. Por último, se determinó el efecto del silenciamiento sobre la actividad enzimática de HK y LDH. La caracterización molecular de HIF-1 mostró que las dos subunidades tienen los dominios conservados bHLH/PAS. Además, la subunidad α tiene el dominio de degradación dependiente de oxígeno (ODD) y el dominio de transactivacion C-terminal (C-TAD) importantes para su regulación. Estas subunidades fueron diferencialmente expresadas en branquias, hepatopáncreas y músculo de camarones sometidos a normoxia (5 mg/L O2) e hipoxia (2.5 y 1.5 mg/L O2). También, el silenciamiento de ambas subunidades fue detectado en branquias, pero no en músculo, 24 h pos-inyección con el RNA de doble cadena (RNAdc). Por otro lado, la hipoxia aumentó de manera tejido-específica la concentración de glucosa y lactato, la cantidad de los transcritos y la actividad específica de HK y LDH. Finalmente, el silenciamiento de ambas subunidades enmascara el aumento de metabolitos (glucosa y lactato), expresión de genes y actividad enzimática de HK
2010
Tesis de doctorado
Español
Público en general
QUÍMICA
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