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CARACTERIZACIÓN MOLECULAR DE LOS GENES tpi Y gdh EN AISLADOS DE Giardia lamblia OBTENIDOS DE PACIENTES SINTOMÁTICOS Y PORTADORES ASINTOMÁTICOS
JUAN PEDRO ORTIZ SANCHEZ
HUMBERTO FRANCISCO ASTIAZARAN GARCIA
GLORIA MARTINA YEPIZ PLASCENCIA
SILVIA YOLANDA MOYA CAMARENA
MARIA AUXILIADORA ISLAS OSUNA
Acceso Abierto
Atribución-NoComercial-SinDerivadas
NUTRICIÓN
Giardia lamblia (G. lamblia) causa la infección conocida como giardiasis la cual puede presentar síntomas como diarrrea y malabsorción o puede ser asintomática. Se caracterizaron molecularmente cuatro aislados de G. lamblia, dos de ellos obtenidos de pacientes sintomáticos y dos de portadores asintomáticos, sobre la base del polimorfismo en los genes que codifican para las enzimas triosa fosfato isomerasa (tpi) y glutamato deshidrogenasa (gdh). Se estandarizó la extracción de ADN genómico a partir de trofozoitos criopreservados, utilizando proteinasa K, detergente bromuro de cetiltrimetilamonio (CTAB) y ciclos de congelación (en nitrógeno líquido) y descongelación (en baño de agua a 65°C). A partir del ADN genómico de los cuatro aislados se amplificó por PCR un fragmento de 579 pb del gen que codifica para tpi y los productos se incubaron con las endonucleasas Xhol y Rsal para determinar sus sitios de restricción. Posteriormente, los productos de PCR se secuenciaron. También se amplificó por PCR un segmento deI gen gdh y sus productos se secuenciaron directamente, sin someterse a RFLP. Los resultados de PCR-RFLP demostraron que las cuatro muestras clínicas de G. lamblia pertenecen al grupo A, subgrupo Al, independientemente de su origen. La secuencia del fragmento deI gen tpi presentó una similitud del 100% de las muestras clínicas con el grupo Al (cepa WB) y 82.3% (99 bases sustituidas de 557) con el grupo B (cepa GS/H7). La secuencia del fragmento del gen gdh presentó una similitud del 100% de las muestras clínicas con el grupo A (aislado Ad-1) y una similaridad de 88.9% (55 bases sustituidas de 495) con el grupo B (aislado Ad-7). Las secuencias nucleotídicas de los genes tpi y gdh de las muestras clínicas estudiadas las clasifican dentro del grupo A, subgrupo Al, lo cual implica un posible origen zoonótico. En la presente investigación, no se encon1ró una diferencia molecular en los genes estudiados que relacione el genotipo de G. lamblia con la manifestación clínica de su infección. Act-·1) y ur1ci similaridad 1fa 88.9'¾, (5!3 bases su:,tituid;,rn de 49!5) con el 9rupo B (aislado Ad-7). Las sec1.11)ncias nucleotldicas de los [¡enes !pi y uri/1 ele l,ls rnuest.ras cllnicas e¡¡tudiadas las clasifioan dentro del grupo A, subrJrupo Al, lo cual implica un posible origen zoonó1ico. En la presente inve:,tlgación, no se encon1ró una diferencia n1oleculr,1r en los genes estudiados que relacione el genotipo de G, lamblia con la manifestación cllnica de su infecc
2003
Tesis de maestría
Español
Público en general
QUÍMICA
Versión publicada
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Aparece en las colecciones: TESIS DE MAESTRÍA EN CIENCIAS.

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