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Caracterización Bioquímica de Quitinasa A y HDL-βGBP de Camarón Blanco Litopenaeus vannamei
EDGAR FELIPE MORAN PALACIO
ROGERIO RAFAEL SOTELO MUNDO
GLORIA MARTINA YEPIZ PLASCENCIA
RAMON PACHECO AGUILAR
ELISA MIRIAM VALENZUELA SOTO
ANA MARIA CALDERON DE LA BARCA COTA
MARIA GABRIELA ROMO FIGUEROA
Acceso Abierto
Atribución-NoComercial-SinDerivadas
TECNOLOGIA DE ALIMENTOS DE ORIGEN ANIMAL|
La lipoproteína de alta densidad y unidora de β-glucanos (HDL-βGBP) y la quitinasa, son proteínas involucradas en el desarrollo del camarón. Mientras que la HDL- βGBP actúa en los sistemas de transporte lipídico y de defensa innata, la quitinasa es necesaria en eI ciclo de muda y digestión de quitina. Estas proteínas tienen en común la capacidad de unir a β- glucanos bajo condiciones de mediana salinidad. En esta tesis se evaluó la interacción de la HDL-βGBP de plasma de camarón con vesículas lipídicas unilamelares y la actividad enzimática de la quitinasa purificada de hepatopáncreas con análogos de quitina. Los mecanismos de interacción fueron evaluados mediante ensayos fluorométricos, encontrándose que la lipoproteína agrega las vesículas sin fusión de membranas o pérdida de contenidos acuosos. Respecto a quitinasa, se detenninó la cinética de Michaelis- Menten para la hidrólisis de un análogo fluorescente, y se evalúo el efecto del pH y fuerza iónica en su actividad. La quitinas a es estable en un rango de pH 5.0-8.0 con un óptimo de actividad en pH 5.5-6.0. La fuerza iónica afectó favorablemente la actividad enzimática en el rango de 0.35-0.75 M de NaCl, mostrando estabilidad en el rango 0-1 M NaCL Los parámetros cinéticos de la enzima no son modificados por esos factores. Aún cuando la interacción con sus respectivos ligandos es diferente entre HDL-βGBP y quitinasa de camarón, se encontró que los valores de las constantes de Michaelis-Menten (Km) de quitinasa/4-metilumbeliferil-triacetilquitotriósido y de disociación (Kd) para HDL-βGBP/ laminoribiosa se encuentran en el mismo orden de magnitud. Los resultados anteriores justifican futuros estudios comparativos mediante técnicas de biología molecular, bioquímica y biofísica para profundizar en su estudio a nivel de estructura y función triacetilquitotriósido y de disociación (Kd) para HDL- GBP/laminoribiosa se encuentran en el mismo orden de magnitud. Los resultados anteriores justifican futuros estudios comparativos mediante técnicas de biología molecular, bioquímica y biofisica para profundizar en su estudio a nivel de estructura y función.
2006
Tesis de doctorado
Español
Público en general
QUÍMICA
Versión publicada
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