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http://ciad.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1006/442| ESTUDIO INTRACELULAR DE TRES QUINESINAS EN Aspergillus nidulans QUE SIRVAN COMO SITIO DE ACCIÓN PARA NUEVOS ANTIFÚNGICOS | |
| ADRIANA CONTRERAS VALENZUELA | |
| IRASEMA DEL CARMEN VARGAS ARISPURO ELISA MIRIAM VALENZUELA SOTO MARISELA RIVERA DOMINGUEZ MIGUEL ANGEL MARTINEZ TELLEZ | |
| Acceso Abierto | |
| Atribución-NoComercial-SinDerivadas | |
| CIENCIAS DE LOS ALIMENTOS | |
| Los hongos filamentos tienen un rápido crecimiento para el cual requiere de un abastecimiento continuo de enzimas y componentes de la pared celular. Este proceso es altamente polarizado y está acompañado por una coordinación en el transporte intracelular dependiente de microtúbulos, los cuales funcionan como una vía para el transporte de organelos. La fuerza para el transporte de vesículas es realizada por proteínas motor, entre las que se encuentran las quinesinas. Se han identificado 11 quinesinas en el genoma del hongo filamentoso Aspergillus nidulans. Sin embargo se conoce muy poco acerca de su función y localización. Con el propósito de relacionar las quinesinas al crecimiento hifal de A. nidulans, se seleccionaron las quinesinas An3124, An3970 y BimC para determinar su localización, mediante la transformación de la cepa TNO2A7 utilizando la técnica de reconocimiento genético, la cual es posible en A. nidulans por recombinación homóloga. Se construyó mediante PCR de fusión un producto compuesto por tres fragmentos; un fragmento del extremo carboxilo terminal de la quinesina de interés, un fragmento de gfp-AfpyrG y un fragmento de la región no traducida de la misma quinesina. Este producto de fusión se utilizó para transformar la cepa TNO2A7 de A. nidulans. Se obtuvieron cepas transformadas para las tres quinesinas1 las cuales contenían el gen de la proteína verde fluorescente en su extremo carboxilo terminal. La insercíón del gen de la proteína verde fluorescente se comprobó mediante PCR y southern blot. La localización intracelular de las quinesinas en la hifa se siguió por microscopía de epífluorescencia, logrando localizar la quinesina BimC en hifas de 12 h de crecimiento. Las quinesinas An3124 y An3970 no fue posible observar su fluorescencia en las hifas de las cepas transformadas, aún cuando se corroboró la correcta inserción de la proteína verde fluorescente en las mutantes. Con estos resultados se puede concluir que se logró marcar con una proteína verde fluorescente los genes de las quinesinas BimC, An3124 y An3970 de A. nidulans. La quinesina BimC está asociada al crecimiento de la hifa en A. nidulans ya que fue posible observar la expresión de la proteína verde fluorescente en la hifa | |
| 2008 | |
| Tesis de maestría | |
| Español | |
| Público en general | |
| QUÍMICA | |
| Versión publicada | |
| publishedVersion - Versión publicada | |
| Aparece en las colecciones: | TESIS DE MAESTRÍA EN CIENCIAS. |
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