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http://ciad.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1006/311| CARACTERIZACIÓN MOLECULAR DEL RECEPTOR CD205 PORCINO Y ANÁLISIS DE LA DISTRIBUCIÓN DEL RECEPTOR EN TEJIDOS LINFOIDES Y CÉLULAS DENDRÍTICAS | |
| LILIAN KAREM FLORES MENDOZA | |
| JESUS HERNANDEZ LOPEZ VERONICA MATA HARO | |
| Acceso Abierto | |
| Atribución-NoComercial-SinDerivadas | |
| "El objetivo de este trabajo fue caracterizar el receptor CD205 porcino y desarrollar un anticuerpo monoclonal anti-CD205 para su uso posterior en el desarrollo de nuevas vacunas en cerdos. Se obtuvo la secuencia completa del receptor CD205 porcino y el análisis de aminoácidos mostró 12 dominios extracelulares, un dominio de fibronectina tipo II, un dominio rico en cisteínas y 10 dominios de reconocimiento de carbohidratos. Además, en la región intracelular se encontraron dos secuencias de aminoácidos importantes debido a que potencialmente favorecen la internalización del receptor y su transporte a vesículas ricas en moléculas del complejo mayor de histocompatibilidad clase II (MHC-II). Estas secuencias se encuentran altamente conservadas en todas las especies para las que se ha reportado la secuencia de este receptor, lo que sugiere su importancia en la función del CD205. El análisis filogenético de esta proteína reveló una homología de 89% con bovinos, 87% con humano, 78% con ratón y solo un 49% con gallo, entre otros analizados. Se determinó la expresión relativa del receptor utilizando PCR en tiempo real, y se encontró mayor expresión en células de Langerhans, mientras que en células dendríticas derivadas de monocitos en estado maduro e inmaduro fue baja. En tejidos, el timo presentó mayor expresión, seguido de ganglios inguinales y mesentéricos. Por otra parte, se obtuvo una proteína recombinante del dominio CTDL-5 del receptor CD205 con la cual se generó un anticuerpo monoclonal. El análisis de citometría mostró que este anticuerpo reconoce poblaciones celulares en ganglios linfáticos (mesentéricos, inguinales, amígdalas y timo) y células dendríticas derivadas de monocitos. Estas poblaciones se caracterizaron por la expresión alta de MHC-II, CD172a y CD14, lo que es compatible con el fenotipo de células dendríticas. En todos los ganglios analizados el reconocimiento del anticuerpo fue mayor al 20% mientras que en timo fue del 5%. La expresión de CD205 en células dendríticas derivadas de monocitos inmaduras fue de 19%, y tras la maduración con LPS se incremento un 10%. También se observó que la expresión del receptor aumentó hasta un 28% en DCs maduras infectadas con el virus del PRRS. La expresión del receptor fue confirmada mediante la detección de la proteína en ganglios mesentéricos y amígdala por inmunotrasferencia, donde se observó que el anticuerpo anti-CD205 reconoce una banda de 200 kDa aproximadamente. " | |
| 2010-12 | |
| Tesis de doctorado | |
| Español | |
| Público en general | |
| BIOLOGÍA Y QUÍMICA | |
| Versión publicada | |
| publishedVersion - Versión publicada | |
| Aparece en las colecciones: | TESIS DE DOCTORADO EN CIENCIAS (DC) |
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