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SÍNTESIS Y EVALUACIÓN DE NANOMATRICES DE NEOGLICANOS DE FUCOIDAN COMO ANTAGONISTAS GLICOMIMÉTICOS PARA Campylobacter jejuni
GIOVANNA SANDOVAL LARIOS
GABRIELA RAMOS CLAMONT MONTFORT
Acceso Abierto
Atribución-NoComercial-SinDerivadas
Campylobacter jejuni es el patógeno emergente considerado como principal agente etiológico de la gastroenteritis infecciosa, a nivel mundial. Su resistencia a antibióticos está aumentado, por lo que se requiere de opciones para controlarlo. Una alternativa es inhibir la adhesión de C. jejuni a las células del hospedero empleando análogos fucosilados que mimeticen a los glicorreceptores que reconoce el microorganismo. La síntesis de estos antagonistas mediante la reacción de Maillard controlada es sencilla y escalable. Se obtuvieron oligosacáridos de fucoidan (OFuc) de Macrocystis pyrifera mediante hidrólisis ácida con HCl 0.01 N, 100 °C y tiempos de 1, 5, 10, 60 y 120 min. Los hidrolizados se fraccionaron por ultrafiltración con membranas de 3 y 1 kDa y se caracterizaron por espectroscopía infrarroja por transformada de Fourier con reflexión total atenuada (FTIR-ATR), dispersión dinámica de la luz (DLS) y electroforesis de carbohidratos asistida por fluoróforos (FACE). Las fracciones <3 kDa conservaron el patrón FTIR-ATR del fucoidan, las <1 kDa cambiaron ligeramente. En ambas disminuyó el grado de sulfatación y enlaces glicosídicos. El análisis por DLS confirmó que las lectinas de UEA I y PNA reconocieron a los OFuc, detectando la presencia de fucosas y galactosas, respectivamente. El análisis por FACE demostró que los OFuc presentaron masas moleculares equivalentes o menores a la masa de 7 moléculas de fucosa (1153 Da). La albúmina sérica bovina (BSA) se glicó con los OFuc a 80, 90 y 100 °C y los neoglicanos obtenidos se caracterizaron por DLS, SDS-PAGE, ATR-FTIR y fluorescencia intrínseca del triptófano (FIT). Los neoglicanos sintetizados fueron reconocidos por las lectinas de UEA I y PNA. La mayor señal se observó con los neoglicanos sintetizados con fracciones <3 kDa en fase sólida, pH 9.0 tratados a 100 °C, durante 30 min. Con este neoglicano se sintetizaron nanomatrices núcleo (BSA) y núcleo-coraza (BSA-BSA-OFuc). Las diferencias de tamaño y carga entre las nanopartículas BSA (227.9 ± 0.9nm y -27.3 ± 0.2mV, respectivamente) y las nanopartículas BSA-BSA-OFuc (312.1 ± 1.7nm y -34.4 ± 0.3mV, respectivamente) así como los espectros FTIR-ATR, demostraron la incorporación exitosa de la coraza fucosilada, presentando, además un bajo índice de polidisperidad (0.08 %). El reconocimiento de C. jejuni hacia neoglicanos BSA-OFuc y nanopartículas BSA-BSA-OFuc requerirá de una mayor caracterización para demostrar su utilidad como antagonistas glicomiméticos.
19-01-2021
Tesis de maestría
Español
CIENCIAS AGROPECUARIAS Y BIOTECNOLOGÍA
Aparece en las colecciones: TESIS DE MAESTRÍA EN CIENCIAS.

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