Por favor, use este identificador para citar o enlazar este ítem:
http://ciad.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1006/1331| CARACTERIZACIÓN BIOQUÍMICA DE LA MONODEHIDROASCORBATO REDUCTASA DE MANGO (Mangifera indica L.) | |
| NACXIT DELGADO TORRES | |
| María Auxiliadora Islas Osuna | |
| Acceso Abierto | |
| Atribución-NoComercial-SinDerivadas | |
| Las plantas se encuentran expuestas al medio ambiente de manera constante bajo condiciones que pueden ser desfavorables, llevándolas a la producción de especies reactivas de oxígeno (ERO) causándoles estrés oxidativo. Para protegerse de los daños causados por las ERO, cuentan con sistemas enzimáticos y no enzimáticos; en las plantas la principal molécula antioxidante es el ácido-L-ascórbico (AA). Cuando el AA actúa sobre las ERO, su concentración celular disminuye, por lo que existen dos rutas de generación de AA para restablecer su homeostasis, la síntesis de novo y la de reciclaje, esta última teniendo una función importante en la adaptación y respuesta al estrés. En esta vía actúan dos enzimas que reciclan los productos oxidados del AA, la monodehidroascorbato reductasa (MDHAR) y la dehidroascorbato reductasa (DHAR). Para conocer mejor a la MDHAR, el objetivo de este trabajo fue caracterizar bioquímicamente a la MDHAR de mango (MiMDHAR). Para esto, la proteína se expresó de manera heteróloga en Escherichia coli y se purificó por cromatografía de afinidad a metales inmovilizados. Con la proteína pura se determinó la actividad enzimática y su estabilidad a diferentes temperaturas y pH. Como resultados, se logró expresar y purificar de forma soluble la MiMDHAR y se determinó su estado oligomérico obteniéndose en forma de monómero, así como la presencia de su cofactor flavin adenosin dinucleótido (FAD) unido de forma natural a la proteína recombinante. La proteína pura mostró una actividad enzimática de 537.78 ± 161.26 U/mg proteína, y constantes cinéticas Vmax, Km, kcat, para el monodehidroascorbato de 44.4 μM/min, 148 μM y 540 min-1, respectivamente. Los resultados muestran que la MiMDHAR es estable en un rango de temperatura de 10 a 55°C y pH de 5.0 a 11.0, siendo una de las más activas entre las MDHAR reportadas a la fecha | |
| 14-09-2018 | |
| Tesis de maestría | |
| Español | |
| BIOLOGÍA Y QUÍMICA | |
| Aparece en las colecciones: | TESIS DE MAESTRÍA EN CIENCIAS. |
Cargar archivos:
| Fichero | Tamaño | Formato | |
|---|---|---|---|
| Necxit Delgado Torres.pdf | 3.22 MB | Adobe PDF | Visualizar/Abrir |