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http://ciad.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1006/1180| PARTICIPACIÓN DEL MICRO-RNA MIR-671-5P EN LA MODULACIÓN DEL PROCESAMIENTO Y PRESENTACIÓN DE ANTÍGENO Y LA ACTIVACIÓN DE IKBα Y ERK1/2 EN CÉLULAS DENDRÍTICAS DERIVADAS DE MONOCITOS PORCINOS ESTIMULADAS CON BB12 | |
| MARLENE BRAVO PARRA | |
| VERONICA MATA HARO | |
| Acceso Abierto | |
| Atribución-NoComercial-SinDerivadas | |
| La interacción entre microorganismos y células de la respuesta inmune innata conlleva a la activación de cascadas de señalización y eventos subsecuentes como el procesamiento y presentación de antígenos. Cuando el microorganismo reconocido es un probiótico, la respuesta se polariza hacia un perfil anti-inflamatorio y la homeostasis. Sin embargo, a pesar de ser ampliamente consumidos e incluso adicionados al alimento de animales de granja como los cerdos, aún no se conocen totalmente los mecanismos de inmunomodulación. Recientemente se reconoció a los microRNAs (miRNAs) como un factor involucrado en la modulación de estos procesos. El objetivo de este trabajo fue evaluar la participación de los miRNAs previamente identificados en un microarreglo [(NCBI GEO dataset (GSE132995)] en el procesamiento y presentación de antígeno, la activación de IKBα y ERK1/2 y expresión de IL-10 en células dendríticas derivadas de monocitos porcinos (moDCs) estimulados con el probiótico Bifidobacterium animalis subsp. lactis BB12 (BB12), mediante un modelo de pérdida de función de los miRNAs identificados a partir de análisis bioinformáticos. Del primer análisis de predicción in silico destacaron los miRNAs miR-30b-3p y miR-9858-5p por unirse a moléculas coestimuladoras de la presentación antigénica como CD80/86, y el miR-671-5p presentó los mejores parámetros de hibridación con el mensajero de IL-10 y otros ocho transcritos. Posteriormente se validó la expresión de los tres miRNAs en moDCs porcinos estimuladas con BB12 y se confirmó su sobreexpresión. Asimismo, se caracterizaron las moDCs por citometría donde el porcentaje de moDCs maduras bajó significativamente al estimular con BB12. También se cuantificó la expresión de IL-10 mediante RT-qPCR, pero no se presentaron cambios después de 6 horas de estímulo. Estos resultados sugieren que la expresión de SLA-DR, CD80/86 e IL-10 podría ser modulada por los miRNAs miR-30b-3p, miR-9858-5p y miR-671-5p respectivamente. Dado el potencial de miR-671-5p como modulador de estos procesos, se generó un modelo de pérdida de función del miR-671-5p y se evaluó la activación de IKBα y ERK1/2 mediante Western-blot en moDCs porcinos con y sin estímulo de BB12. En ausencia de miR-671-5p, IKBα resultó activada, pero no al estimular con BB12. Mientras que la activación de MAPK no fue concluyente. Por otra parte, en ausencia de miR-671-5p, BB12 induce un aumento significativo de IL-10 a nivel de transcrito a las 4 horas de estímulo | |
| 26-08-2021 | |
| Tesis de doctorado | |
| Español | |
| BIOLOGÍA MOLECULAR | |
| Versión publicada | |
| publishedVersion - Versión publicada | |
| Aparece en las colecciones: | TESIS DE DOCTORADO EN CIENCIAS (DC) |
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