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CARVACROL INHIBE EL PROCESO DE FORMACIÓN DE BIOPELÍCULAS Y PRODUCCIÓN DE EXOENZIMAS DE Pectobacterium carotovorum
MARIA MELISSA GUTIERREZ PACHECO
Jesús Fernando Ayala Zavala
Acceso Abierto
Atribución-NoComercial-SinDerivadas
Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum es una bacteria causante de la pudrición blanda en tejidos vegetales debido a su capacidad para formar biopelículas y exoenzimas. La virulencia de P. carotovorum está regulada por quorum sensing (QS), a través de la síntesis y reconocimiento de acil homoserina lactonas (AHLs), por medio de las proteínas ExpI/ExpR. Por lo que una estrategia para su control sería interrumpir el QS aplicando carvacrol, un terpenoide antibacteriano del aceite esencial de orégano que ha afectado el QS en otras bacterias. Por esta razón, el objetivo de este trabajo fue determinar el efecto del carvacrol sobre la síntesis de AHL para inhibir la formación de biopelículas y síntesis de exoenzimas de P. carotovorum. Las concentraciones mínimas inhibitorias y bactericidas del carvacrol fueron de 2.66 y 3.99 mM, respectivamente; mientras que concentraciones de 1.33 y 3.99 mM fueron necesarias para inhibir y erradicar biopelículas, respectivamente. Se eligió la concentración de 0.66 mM de carvacrol para evaluar su efecto sobre las variables de respuesta de interés, sin afectar la viabilidad celular y poder tener un acercamiento sobre su posible mecanismo de acción. A esta concentración, se redujo la carga superficial bacteriana (-2.15 mV), potencial de adhesión (-1.5 mJ/m2), motilidad (48.2 mm) y síntesis de polisacáridos (13.83 EG/cm2) de P. carotovorum comparado con el control. Adicionalmente, el carvacrol afectó la síntesis de exoenzimas, mostrando una reducción en la actividad poligalacturonasa (38.76%) y pectato liasa (50.19%) e incidencia de la enfermedad causada por esta bacteria en un 70-90% en tejidos de papa con respecto al control. La disminución de los factores de virulencia mencionados anteriormente se relacionó con una posible interacción entre carvacrol y la proteína ExpI, causando una reducción (8.93%) en la síntesis 3-oxo-C6-AHL, molécula implicada en la regulación de estos procesos. Esto se evidenció en el análisis de modelaje molecular el cual mostró interacciones hidrofóbicas en el sitio de unión a la cadena de acilos (-4.7 kcal/mol) de ExpI. En conclusión, el carvacrol afectó el proceso de formación de biopelículas y síntesis de exoenzimas de P. carotovorum y dicho efecto se relacionó con una reducción de AHLs. Palabras clave: terpenoide, comunicación intercelular, agregados bacterianos, enzimas extracelulares, anti-virulencia.
30-08-2019
Tesis de doctorado
Español
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