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http://ciad.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1006/1088| SILENCIAMIENTO GÉNICO DE MIOSTATINA-1 EN TEJIDO MUSCULAR DE Lutjanus guttatus | |
| JULIA MARIA TORRES VELARDE | |
| SILVIA ALEJANDRA GARCIA GASCA LEONARDO IBARRA CASTRO | |
| Acceso Abierto | |
| Atribución-NoComercial-SinDerivadas | |
| Acuacultura y manejo ambiental | |
| El músculo esquelético representa la mayor fuente de proteínas y comprende entre un 40-60% de la masa corporal en peces. El crecimiento muscular es regulado por diversos factores, entre los que destaca el factor de diferenciación de crecimiento 8 (GDF-8) conocido como miostatina y es considerado un inhibidor de la diferenciación y proliferación de miocitos. La miostatina ha sido investigada con la finalidad de evaluar su función en teleósteos; además su inactivación ha resultado atractiva para implementar técnicas de mejora biotecnológica en acuicultura. En el pargo flamenco Lutjanus guttatus, se identificaron dos transcritos de miostatina (mstn-1 y mstn-2) los cuales difieren en algunos elementos regulatorios, lo que se refleja en distintos patrones de expresión. Debido a que mstn-1 aparentemente posee mayor implicación en el desarrollo muscular, fue seleccionado para llevar a cabo los experimentos de silenciamiento. Con la finalidad de establecer la mejor estrategia de bloqueo, la mstn-1 de L. guttatus se expresó y silenció en una línea celular de fibroblastos de ratón (NIH 3T3) evaluando cuatro secuencias de RNA de interferencia, mediante dos estrategias de silenciamiento (shRNA y dsiRNA). Una vez seleccionadas las secuencias que presentaron mejores resultados, se aplicaron en un sistema de cultivo ex vivo de tejido muscular silenciando la mstn-1 endógena de pargo. Posteriormente se aplicaron condiciones de estrés inducido por dexametasona, evaluando los mecanismos de atrofia muscular, así como el papel que juega la mstn-1 en el catabolismo muscular ocasionado por glucocorticoides. Finalmente, se silenció la mstn-1 in vivo mediante la inyección local de secuencias dsiRNA en el tejido muscular de L. guttatus y se evaluó el efecto del bloqueo de mstn-1 al analizar la ganancia en peso y talla de los organismos. Los resultados muestran que la mstn-1 se activa en respuesta al estrés causado por glucocorticoides, provocando atrofia muscular mediante la degradación de proteínas por el sistema ubiquitina-proteosoma, además de inhibir la síntesis de proteínas. La inyección de dsiRNA-mstn-1 in vivo redujo los niveles de expresión de la mstn-1 en músculo de juveniles de pargo, generando hipertrofia de fibras musculares. Sin embargo, el fenotipo de crecimiento muscular no fue evidente debido probablemente a la pérdida del efecto sobre la abundancia del transcirto después de cinco días. | |
| Centro de Investigación en Alimentación y Desarrollo, A.C. | |
| 2018 | |
| Tesis de doctorado | |
| Español | |
| Bibliotecarios Estudiantes Investigadores Público en general | |
| BIOLOGÍA MOLECULAR | |
| Versión publicada | |
| publishedVersion - Versión publicada | |
| Aparece en las colecciones: | TESIS DE DOCTORADO EN CIENCIAS (DC) |
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